Mục lục:
1. Lời
mở đầu........................................................................................................... 1
1.1. Đặt vấn đề......................................................................................................... 1
1.2.Mục
tiêu đề tài.................................................................................................. 2
1.3.Yêu
cầu đề tài.................................................................................................... 2
2. Tổng
quan tài liệu............................................................................................... 3
2.1. Axit phytic........................................................................................................ 3
2.2. Đặc điểm của axit Phytic và
vai trò của nó.................................................. 4
2.2.1. Axit phytic đối với cây trồng...................................................................... 6
2.2.2.
Axit phytic với con người, vật nuôi và môi trường.................................. 7
2.2.2.1.
Ảnh hưởng của axit phytic đối với con
người....................................... 7
2.2.2.2.
Ảnh hưởng của axit phytic đối với vật nuôi và môi trường................ 7
2.3. Công nghệ sinh học phân tử trên cây lúa..................................................... 9
2.4.
Nghiên cứu di truyền gen axit phytic thấp................................................... 11
2.5.
Đánh dấu siêu vệ tinh (Microsattelite)......................................................... 15
2.6. Quá
trình sinh tổng hợp axit phytic.............................................................. 15
3. Vật
liệu và phương pháp nghiên cứu............................................................... 18
3.1 Thời
gian và địa điểm thực hiện đề tài.......................................................... 18
3.2. Vật
liệu.............................................................................................................. 18
3.3.
Nguồn gốc vật liệu........................................................................................... 18
3.4.
Dụng cụ và hóa chất........................................................................................ 20
3.4.1.
Dụng cụ.......................................................................................................... 20
3.4.2.
Hóa chất......................................................................................................... 20
3.4.2.1.
Hóa chất phân tích sinh hóa.................................................................... 20
3.4.2.2.Hóa chất phân tích phân tử...................................................................... 20
3.5. Xác
định lượng photpho trong hạt bằng phương pháp sinh hoá............... 21
3.5.1.
Phương pháp thực hiện................................................................................ 21
3.5.2.
Tiến hành phân tích..................................................................................... 22
3.6.
Đánh giá kiểu gen qua chỉ thị phân tử.......................................................... 23
3.6.1.
Phân lập DNA từ mẫu lá lúa........................................................................ 22
3.6.2.
Kiểm tra chất lượng DNA............................................................................ 25
3.6.3. Phân tích SSR................................................................................................ 26
3.6.3.1.
PCR dùng cho một phản ứng................................................................... 27
3.6.3.2.
Phương pháp tiến hành............................................................................. 27
3.6.3.3.
Phân tích mẫu trên gel.............................................................................. 28
4. Kết quả và thảo luận........................................................................................... 29
4.1.
Đánh giá tính trạng axit phytic thấp qua phản ứng sinh hóa..................... 29
4.1.1. Quần
thể lúa mùa và lúa cao sản................................................................ 29
4.1.2. Quần thể lúa đột biến................................................................................... 31
4.1.2.1. Quần thể lúa đột biến OM 1490 và OMCS 2000 ở thế hệ M3............ 31
4.1.2.2. So sánh với kết quả ở thế hệ
M2 được nghiên cứu trước đây.............. 36
4.1.2.3. Quần thể lúa đột biến OM 1490 và OMCS 2000 ở thế hệ M4............ 36
4.2.Đánh
giá tính trạng axit phytic thấp bằng Marker SSR............................... 38
4.2.1.Trên
quần thể lúa mùa và lúa cao sản........................................................ 32
4.2.2. Trên quần thể đột biến OM 1490 ở thế hệ M 4........................................ 40
5. Kết luận
và đề nghị............................................................................................. 43
5.1. Kết
luận............................................................................................................. 42
5.2. Đề
nghị.............................................................................................................. 44
6. Tài liệu
tham khảo.............................................................................................. 45
6.1.Tài
liệu tiếng việt.............................................................................................. 45
6.2. Tài
liệu tiếng nước ngoài................................................................................ 45
Địa chỉ download tài liệu: [You must be registered and logged in to see this link.]
1. Lời
mở đầu........................................................................................................... 1
1.1. Đặt vấn đề......................................................................................................... 1
1.2.Mục
tiêu đề tài.................................................................................................. 2
1.3.Yêu
cầu đề tài.................................................................................................... 2
2. Tổng
quan tài liệu............................................................................................... 3
2.1. Axit phytic........................................................................................................ 3
2.2. Đặc điểm của axit Phytic và
vai trò của nó.................................................. 4
2.2.1. Axit phytic đối với cây trồng...................................................................... 6
2.2.2.
Axit phytic với con người, vật nuôi và môi trường.................................. 7
2.2.2.1.
Ảnh hưởng của axit phytic đối với con
người....................................... 7
2.2.2.2.
Ảnh hưởng của axit phytic đối với vật nuôi và môi trường................ 7
2.3. Công nghệ sinh học phân tử trên cây lúa..................................................... 9
2.4.
Nghiên cứu di truyền gen axit phytic thấp................................................... 11
2.5.
Đánh dấu siêu vệ tinh (Microsattelite)......................................................... 15
2.6. Quá
trình sinh tổng hợp axit phytic.............................................................. 15
3. Vật
liệu và phương pháp nghiên cứu............................................................... 18
3.1 Thời
gian và địa điểm thực hiện đề tài.......................................................... 18
3.2. Vật
liệu.............................................................................................................. 18
3.3.
Nguồn gốc vật liệu........................................................................................... 18
3.4.
Dụng cụ và hóa chất........................................................................................ 20
3.4.1.
Dụng cụ.......................................................................................................... 20
3.4.2.
Hóa chất......................................................................................................... 20
3.4.2.1.
Hóa chất phân tích sinh hóa.................................................................... 20
3.4.2.2.Hóa chất phân tích phân tử...................................................................... 20
3.5. Xác
định lượng photpho trong hạt bằng phương pháp sinh hoá............... 21
3.5.1.
Phương pháp thực hiện................................................................................ 21
3.5.2.
Tiến hành phân tích..................................................................................... 22
3.6.
Đánh giá kiểu gen qua chỉ thị phân tử.......................................................... 23
3.6.1.
Phân lập DNA từ mẫu lá lúa........................................................................ 22
3.6.2.
Kiểm tra chất lượng DNA............................................................................ 25
3.6.3. Phân tích SSR................................................................................................ 26
3.6.3.1.
PCR dùng cho một phản ứng................................................................... 27
3.6.3.2.
Phương pháp tiến hành............................................................................. 27
3.6.3.3.
Phân tích mẫu trên gel.............................................................................. 28
4. Kết quả và thảo luận........................................................................................... 29
4.1.
Đánh giá tính trạng axit phytic thấp qua phản ứng sinh hóa..................... 29
4.1.1. Quần
thể lúa mùa và lúa cao sản................................................................ 29
4.1.2. Quần thể lúa đột biến................................................................................... 31
4.1.2.1. Quần thể lúa đột biến OM 1490 và OMCS 2000 ở thế hệ M3............ 31
4.1.2.2. So sánh với kết quả ở thế hệ
M2 được nghiên cứu trước đây.............. 36
4.1.2.3. Quần thể lúa đột biến OM 1490 và OMCS 2000 ở thế hệ M4............ 36
4.2.Đánh
giá tính trạng axit phytic thấp bằng Marker SSR............................... 38
4.2.1.Trên
quần thể lúa mùa và lúa cao sản........................................................ 32
4.2.2. Trên quần thể đột biến OM 1490 ở thế hệ M 4........................................ 40
5. Kết luận
và đề nghị............................................................................................. 43
5.1. Kết
luận............................................................................................................. 42
5.2. Đề
nghị.............................................................................................................. 44
6. Tài liệu
tham khảo.............................................................................................. 45
6.1.Tài
liệu tiếng việt.............................................................................................. 45
6.2. Tài
liệu tiếng nước ngoài................................................................................ 45
Địa chỉ download tài liệu: [You must be registered and logged in to see this link.]